Genotipificación del virus del papiloma humano en mujeres embarazadas VPH positivas / Genotyping of human papillomavirus in HPV-positive pregnant women

Resumen Antecedentes: Las embarazadas infectadas por el virus del papiloma humano presentan condiciones médicas que influyen en el curso de la enfermedad y pueden potenciar la posibilidad de transmisión vertical. Objetivo: Identificar los genotipos del virus del papiloma humano más frecuentes en mujeres embarazadas. Método: Estudio retrospectivo, observacional y descriptivo. Se emplearon muestras de raspado cervical. La extracción de material genético se hizo por la técnica de fenol-cloroformo y se amplificó empleando iniciadores universales MY09/MY11. Las muestras positivas se genotipificaron con un kit que detecta 37 genotipos diferentes. Resultados: Se identificaron 341 genotipos. Los más frecuentes fueron 16 (10.3%), 52 (8.8%) y 59 (8.6%). En el 75.9% la detección fue con un genotipo y en el 42.7% se detectaron infecciones múltiples. Conclusiones: Es sabido que la infección por virus del papiloma humano en mujeres embarazadas raramente evolucionará a lesiones invasivas. Se deberán considerar tanto las posibles complicaciones obstétricas a corto y largo plazo, así como las posibles repercusiones en la salud del recién nacido. La detección elevada del genotipo 16 sugiere un seguimiento estrecho para considerar un abordaje óptimo posterior a la gestación.

Abstract Background: Pregnant women infected with human papillomavirus have medical conditions that influence the course of the disease and can increase the possibility of vertical transmission. Objective: To identify the most common human papillomavirus genotypes in pregnant women. Method: Retrospective, observational and descriptive study. Cervical scraping samples were used. The extraction of genetic material was done by the phenol-chloroform technique and was amplified using universal primers MY09/MY11. Positive samples were genotyped with a kit that detects 37 different genotypes. Results: Three hundred forty-one genotypes were identified. The most frequent were 16 (10.3%), 52 (8.8%), and 59 (8.6%). In 75.9% the detection was with one genotype and in 42.7% multiple infections were detected. Conclusions: It is known that human papillomavirus infection in pregnant women will rarely evolve to invasive lesions. Both possible short- and long-term obstetric complications, as well as possible repercussions on the health of the newborn, should be considered. The high detection of genotype 16 suggests close follow-up to consider an optimal post-pregnancy approach.

Genotipificación del virus del papiloma humano en mujeres que asisten a un hospital gineco-obstétrico de tercer nivel de la Ciudad de México / Genotyping of human papillomavirus in women attending a third-level of gynecological-obstetric hospital in Mexico City

Objetivo: Determinar la frecuencia de infección por el virus del papiloma humano en pacientes que acudieron a un hospital de tercer nivel de atención en la Ciudad de México. Método: Se realizó un estudio prospectivo, transversal y descriptivo que incluyó 65 mujeres entre 15 a 46 años que asistieron a consulta para atención gineco-obstétrica. A todas las participantes se les tomó una muestra cervical para la detección/genotipificación del papiloma virus mediante la prueba Linear Array HPV Genotyping Test in vitro® (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ). Resultados: Un total de 36 (55,4%) pacientes resultaron positivas al virus, en las que se identificaron 65 genotipos virales tanto en infección única (38,9%) como en infección por múltiples (61,1%) genotipos. El 29,2% de los genotipos identificados, fueron de alto riesgo. Los genotipos de alto riesgo más frecuentes fueron: VPH52 y 51; mientras que los genotipos de bajo riesgo más comunes fueron: VPH6 y 53. Un tercio de las pacientes con infección mostraron al menos un genotipo de alto riesgo. Conclusión: En este estudio, se observó una frecuencia relativamente baja de genotipos de alto riesgo del virus del papiloma humano, sin embargo se identificó un porcentaje importante de co-infección por múltiples genotipos. Por esta razón, se considera necesario dar seguimiento a mediano y largo plazo para monitorear la evolución de la infección.

Objective: To identify which are the most frequent genotypes of human papilloma virus among a group of gynecologic-obstetric patients at tertiary care hospital in Mexico City. Method: A prospective and descriptive cross-sectional study was carried out among a group of 65 women, aged 15-46 years, receiving gynecological-obstetric care. Cervical specimens were taken from all participants for direct HPV detection/ genotyping by means of a Linear Array HPV Genotyping Test in vitro® (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ). Results: Virus detection was achieved in 36 patients (55.4%), with a total of 65 genotypes, either as single (38.9%) or multiple-genotype (61.1%) infections. High risk genotypes accounted for only 29.2% of all genotype. The most frequent high risk genotypes were HPV52 and 51, while HPV6 and 53 were the most frequent low risk ones. At least one high risk genotype was present in one third of infected patients. Conclusion: The relative low frequency of oncogenic human papilloma virus genotypes among the women in this study was observed, however a significant percentage of co-infection with multiple genotypes were identified. Thus, mid- to long-term follow up might be necessary for those patients to monitor the evolution of the infection.

Relación entre infertilidad masculina e infección genitourinaria por micoplasmas: Una actualización / Relationship between male infertility and genitourinary mycoplasma infection: An update

Por más de 30 años se ha sugerido que las infecciones seminales causadas por micoplasmas promueven el deterioro de la funcionalidad de los espermatozoides humanos. Sin embargo, los estudios al respecto han mostrado resultados contradictorios. En esta revisión presentamos las evidencias recientes de estudios in vitro que confirman que Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, U. parvum y M. genitalium pueden adherirse e invadir los espermatozoides humanos viables y móviles. Así mismo discutiremos cómo estas infecciones pueden causar: a) estrés oxidativo en los espermatozoides; b) interrupción de los mecanismos de producción de energía que alteran la movilidad y viabilidad espermática; c) desorganización de la estructura nuclear y celular por efecto de las endonucleasas, fosfolipasas y aminopeptidasas bacterianas; d) enmascaramiento de los receptores quimiotácticos y obstaculización de la fecundación, y e) compromiso de la integridad de la membrana espermática, con exposición de autoantígenos y respuesta autoinmune.

It has been suggested for more than 30 years that seminal infections caused by mycoplasmas provoke impairment of the human sperm functionality. However, the studies have shown conflicting results. This review presents recent evidence from in vitro studies that confirm adherence and invasiveness toward human spermatozoa by Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, U. parvum and M. genitalium. We discuss how those infections can cause: a) sperm oxidative stress; b) disruption of energy production mechanisms that lead to impaired sperm motility and viability; c) disturbance of nuclear and cellular organization by effect of bacterial endonucleases, phospholipases and aminopeptidases; d) masking of chemotactic receptors and obstruction of fertilization, and e) compromise of sperm's membrane integrity, with exposure of self-antigens and auto-immune responses.

Infección por Chlamydia trachomatis en varones y su asociación con las alteraciones ginecológicas de su compañera sexual / Chlamydia trachomatis infection in men and its association to gynecologic alterations of his sexual mate

Objective.To determinate the frequency of Chlamydia trachomatis infection in male partners of infertile couples who attend to the infertility clinic at Instituto Nacional de Perinatologia, as well as to compare the clinical data and lifestyle between C. trachomatis-inifected and uninfected men to establish a possible association with gynecological damage in their sexual female partners. Methods. An open prospective study was performed in infertile couples, whose follow up was carried out at Instituto Nacional de Perinatologia between June 2000 and April 2001. Urethral and cervical swabs were obtained from each couple and the specimens were subjected to a C. trachomatis-specific liquid-phase hibridization test (PACE-2) and routine microbiological analysis. Semen analysis were also included. A relative risk (RR) test was done to analyze variables and square chi test was used to analize clinical and gynecological data from female partners and data from semen examination. Statistical differences were considered as significant when the p value was below 0.05. Results. C. trachomatis active infection was found in 14 out of 384 urethral swabs (3.6%). No significant alterations were observed in semen samples of C. trachomatis-infected men, as compared to non-infected individuals. Microbiological analyses of semen showed a significant isolation o/Mycoplasma sp (RR = 5.87, IC95% 1.4-24.7). Eight out of fourteen female partners of C. trachomatis-infected men were also infected with C. trachomatis (RR= 10.57, IC95% 5.67-19.7), Candida albicans was other pathogen isolated from 8/14 of those women (RR = 1.89, IC95% 1.17-3.05). Gynecological and obstetrical associations found among female partners of C. trachomatis-infected men were as follows: tubal adhesions in 10/14 (RR = 1.54, IC95% 1.08-2.18), salpingitis in 2/14 (RR = 2.2), history of ectopic pregnancies in 11/14 (RR =2.94, IC95% 1.01-8.53) and abnormal pregnancy loss in 9/14 (RR = 1.5). Conclusion. A low prevalence of C. trachomatis infection was observed among male partners of infertile couples as compared with other reports, but this discrepancy could be attributable to the specimen collection and diagnostic assay used. Otherwise, this data suggests that a chronic pathogen's antigenic stimulation may result in an increased formation of tubal adhesions and/or in ectopic pregnancies among female partners of C. trachomatis-infected individuals. Thus, preventive and control measures must be introduced into men's healthcare services, through laboratory and clinical examination, since these subjects are the main reservoirs of C trachomatis.

Objetivo. Determinar la frecuencia de infección por Chlamydia trachomatis y comparar la información clínica y el estilo de vida de varones con y sin infección por este patógeno, así como su asociación con las alteraciones ginecológicas que presenta su compañera sexual en un grupo de parejas que asisten a la Clínica de Infertilidad del Instituto Nacional de Perinatologia de la Ciudad de México. Métodos. Se realizó un estudio abierto, longitudinal y prospectivo en un grupo de parejas con diagnóstico de infertilidad, que fueron tratadas en el Instituto Nacional de Perinatologia durante el periodo de junio del 2000 a abril del 2001. Se recolectaron muestras uretrales y cervicales de cada pareja para el diagnóstico de C. trachomatis mediante la prueba de hibridación en fase líquida (PACE-2). También se recolectaron muestras de semen para el análisis de espermatobioscopia y se hicieron cultivos microbiológicos de rutina a las muestras cervicales y de semen. Los datos microbiológicos, clínicos y ginecológicos de los participantes fueron comparados por %z, el análisis de tendencia para proporciones fue usado para establecer el nivel de riesgo en las variables (RR). Las diferencias fueron consideradas estadísticamente significativas si p < 0.05. Resultados. Se analizaron un total de 384 muestras uretrales de varones, 14 presentaron infección activa por C. trachomatis (3.6%), Los datos de espermatobioscopia de los individuos positivos a C. trachomatis no mostraron alteraciones significativas con respecto al de varones no infectados con esta bacteria. El análisis microbiológico del semen mostró un número de aislamientos significativos de infección por Mycoplasma sp. (RR = 5.87, IC95% 1.40-24.70). En cuanto a las muestras cervicovaginales de mujeres con compañero sexual infectado por C. trachomatis, los patógenos aislados con mayor frecuencia fueron: Candida albicans en ocho de 14 (RR = 1.89, IC95% 1.17-3.05) y C. trachomatis en ocho de 14 (RR = 10.57, IC95% 5.67-19.7). Las asociaciones ginecológicas y obstétricas de la compañera sexual de varones positivos a C. trachomatis fueron adherencias tubáricas en 10 de 14 (RR = 1.54, IC95% 1.08-2.18), salpingitis en dos de 14 (RR = 2.2), antecedentes de embarazos ectópicos en 11 de 14 casos (RR = 2.94, IC95% 1.01-8.53) y abortos previos en nueve de 14 (RR = 1.5). Conclusión. Se observó una baja prevalencia de infección por C. trachomatis en los varones de mujeres infértiles en comparación con lo reportado por otros autores, esta diferencia puede estar dada por el método de diagnóstico y la toma del producto. Estos resultados sugieren que el estímulo constante del patógeno produce un aumento de adherencias tubáricas y embarazos ectópicos en las compañeras sexuales de los varones infectados con C. trachomatis. Por lo que una evaluación diagnóstica y de laboratorio deberá ser llevada a cabo en el varón como una medida de prevención y control para la infección por este patógeno, ya que estos individuos actúan como reservónos importantes de infección.

Factores de riesgo y secuelas reproductivas asociados a la infección por Chlamydia trachomatis en mujeres infértiles / Risk factors and reproductive sequelae associated with Chlamydia trachomatis infection in infertile women

OBJETIVO: Comparar la información clínica y el estilo de vida sexual en dos grupos de mujeres con y sin infección por Chlamydia trachomatis que asisten a la clínica de infertilidad del Instituto Nacional de Perinatología, de la Ciudad de México. MATERIAL Y MÉTODOS: De febrero a noviembre de 1998, se realizó un estudio prospectivo en pacientes con diagnóstico de infertilidad. En el estudio se incluyó a pacientes con diagnóstico de infertilidad, tratados en el Instituto Nacional de Perinatologia, de la Ciudad de México, durante 1988. Las muestras endocervicales de 309 mujeres, que incluyeron a 77 con infección y a 232 sin infección, fueron examinadas para Chlamydia trachomatis, usando inmunofluorescencia directa. Los cultivos vaginales fueron obtenidos antes de iniciar el tratamiento. También se investigó la presencia de otros agentes infecciosos de transmisión sexual y la información demográfica, de conducta sexual, histórica y clínica fue recopilada de cada paciente. Los datos clínicos y ginecológicos de ambos grupos fueron comparados por ji2. La magnitud de las asociaciones fueron establecidas por razón de momios en análisis bivariados. Se realizó un análisis de regresión logística para establecer los efectos confusores en relación con los factores analizados. Las diferencias fueron consideradas estadísticamente significativas si p<0.05. RESULTADOS: Para el estudio 309 mujeres fueron elegibles, 77 (24.9 por ciento) cursaron con infección por C trachomatis, de éstas, 70 (90.9 por ciento) mencionaron tener un compañero sexual, 58 (75.3 por ciento) estaban casadas, 19 (24.7 por ciento) eran solteras o vivían en concubinato, 15 (19.5 por ciento) utilizaron el dispositivo intrauterino para el control de la natalidad, 41 (53.2 por ciento) presentaron coinfección con otros agentes infecciosos de transmisión sexual, y 19 (24.7 por ciento) cursaron con infertilidad por obstrucción tubárica. Las secuelas reproductivas observadas en las pacientes con infección por C trachomatis mostraron que 24 (31.2 por ciento) tuvieron abortos, 50 (64.9 por ciento), gestaciones previas, 26 (33.8 por ciento) anormalidades en el cérvix y 50 (64.9 por ciento) secreciones vaginales purulentas, con dolor (18.1 por ciento). El análisis bivariado mostró que los factores de riesgo asociados significativamente con la infección por C trachomatis fueron la presencia de un compañero sexual (OR= 2.96, IC 95 por ciento 1.22-7.5, p=0.008), concubinato (RM=3.68, p=0.03) y uso de...

Induction of tumor necrosis factor-alpha by cefodizime in U-937 cells

La cefodizima presenta efectos moduladores sobre la liberación de diversas citocinas. En esta investigación se determinó la actividad moduladora de este antibiótico sobre la producción del factor de necrosis tumoral (TNF) en una línea de células monocitica humana U-937. La medición de TNF se realizó mediante las pruebas de ELISA y bioensayo de citotoxicidad empleando células L-929. Los resultados mostraron que la cefodizima por si sola indujo la producción de TNF sobre las células U-937, sin embargo, la adición de LPS condujo a una disminución en la liberación de esta citocina (p<0.05). Por otro lado la combinación cefodizima-PMA tuvo un efecto sinérgico (p<0.05), sin embargo, la adición de LPS a esta combinación causó una disminución de la producción de TNF (p<0.05). Con estos resultados observamos que la cefodizima regula la producción de TNF en las células U-937, produciendo una menor concentración de TNF con la adición de LPS.

Tumor necrosis factor in peritoneal fluid from asymptomatic infertile women

Background. Tumor necrosis factor-Ó (TNF-Ó) is a cytokine that can be found in the peritoneal fluid (PF) of patients with endometriosis and pelvic inflammatory disease (PID) as a response to inflammatory disorders and infections. The cytotoxic effect of this cytokine could be a factor participating in the pathology of various gynecological diseases, and could also be accountable for the high immunological response and demage to the tubal epithelium. The objective of this study was ato establish the presence of TNF-Ó in asymptomatic infertility and its association with various isolated bacteria. Methods. Ten milliliters of PF were collected from each of 73 patients by means of laparoscopy and cultured in synthetic medium and McCoy cells for the isolation of aerobic and anaerobic bacteria, as well as for Chlamydia trachomatis. The activity of TNF-Ó was determined by means of a bioassay using L-929 cells. Results. Forty-three parcent of the PFs showed positive TNF-Ó activity, while the laparoscopic evaluation showed that 32 patients had Fallopian tube occlusion (FTO), 7 had endometriosis, 30 had PID. and 4 had myomas and adhesions. TNF-Ó activity was found to be high in FTO patients (P<0.05). Positive cultures were found in 50.7 percent of patients; of these, 31.5 percent had PID (p< 0.05), and only 20.5 percent of positive cultures were TNF-Ó positive. Chlamydia trachomatis (16 percent) was the most frequently isolated bacteria in these patients. Conclusions. The detection of TNF-Ó could be useful in the diagnosis of active infectious and inflammatory diseases in asymptomatic infertile patients

Actividad aglutinante, opsonizante y de fijación de complemento de la gammaglobulina intravenosa humana de molécula intacta (inacglobin) / Aglutinant, opsonizant and complement dependent bactericidal activity of intravenous gamma globulin of intact molecule (intacglobin)

Objetivo: estudiar la actividad aglutinante, opsonizante y de fijación de complemento de la gammaglobulina intravenosa de molécula intacta (Intacglobin). Material y métodos: se evalluó la actividad aglutinante, opsonizante y de fijación de complemento de la gammaglobulina intravenosa de molécular intacta (Intacglogin) en contra de E. coli, E, cloacae, E. faecalis, P. aeruginos, K. pneumoniae y S. aureus. Resultados: en diez diferentes lotes de intacglobin se demostró que se tienen títulos de anticuerpos aglutinantes arriba de la dilución 1:16. La determinación de la actividad de opsono-fagocitosis demostró que cuando se emplea la gammaglobulina intravenosa a una dilución 1:10, la fagocitosis es mayor del 50 por ciento en comparación con las bacterias no opsonizadas (grupo control). Por último, la actividad bactericida de los anticuerpos dependiente del complemento mostró que todos los lotes tienen una actividad de fijación de complemento mayor a la dilución 1:50. Conclusiones: estos resultados sugieren que la gammaglobulina intravenosa Intacglobin presenta altos niveles de anticuerpos específicos en contra de los patógenos más frecuentes de septicemia en el recién nacido

Evaluación de la sensibilidad y especificidad de tres reactivos de inmunofluorescencia directa para el diagnóstico de Chlamydia trachomatis / Evaluation of sensitivity and specificity of three reagents of direct immunofluorescence for the diagnosis of chlamydia trachomatis

Se evaluó la sebsibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo y porcentaje de falsas positivas y negativas de tres reactivos de inmunofluorescencia directa para el diagnóstico de infecciones por Chlamydia trachomatis. Se estudiaron 150 muestras de raspados cervicovaginales y 50 muestras de líquido peritoneal de pacientes con enfermedad pélvica inflamatoria. Los reactivos en contra de la proteína principal de membrana externa presentaron mayor sensibilidad pero menor especifidad que el reactivo de inmunofluorescencia contra el lipopolisacárido de Chlamydia trachomatis